儿童关煞化解方法小儿三十六关煞摘 要 目的：建立小儿化毒散中胆红素的含量测定方法。方法：本实验采用比色法测定胆红素的含量，用重氮化试剂为显色剂，检测波长为533 nm。结果：胆红素浓度在0.010 3～0.050 0 mg/ml范围内与吸收度呈良好的线.45， n=6）。结论：该法简便、快速、稳定、可靠，可用于测定小儿化毒散中胆红素的含量。

　　小儿化毒散收载于《中华人民共和国药典》（2010年版I部），由大黄、冰片、人工牛黄、黄连、天花粉、珍珠、赤芍和川贝母等12味药组成，具有清热解毒、活血消肿的功效，用于小儿热毒内蕴、毒邪未尽之口疮肿痛，烦躁口渴，大便秘结等症[1] 。其中人工牛黄含有效成份胆红素，其质量标准中未收载检测方法。为能更好地控制本制剂质量，本文采用比色法对胆红素进行含量测定[2-3]。

　　紫外可见分光光度计（美国Varian公司）；BP211D型电子天平（德国Sartorius公司）；电热恒温水浴锅（江苏南通县通海电器厂）等。

　　胆红素对照品（中国药品生物制品检定所，批号10077-0101），水为蒸馏水，其他试剂均为分析纯。小儿化毒散（广西南珠制药有限公司，0.6 g/瓶，批号：20110402）。

　　精密称取胆红素对照品10 mg至100 ml棕色量瓶中，加三氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取5 ml至50 ml棕色量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得。

　　取装量差异项下的内容物，混匀，精密称取15 g装量的样品，置圆底烧瓶中，加三氯甲烷-乙醇（7：3）混合溶液60 ml、盐酸1滴，摇匀，置水浴65 ℃中加热回流30 min，放冷，过滤，置100 ml棕色量瓶中。容器用少量混合溶液洗涤，洗液并入同一量瓶中，加上述混合溶液至刻度，摇匀。精密量取上清液10 ml，置50 ml棕色量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得。

　　精密量取胆红素对照品2 ml，置具塞试管中，加乙醇至9 ml，精密加入重氮化溶液（甲液：取对氨基苯磺酸0.1 g，加盐酸1.5 ml与蒸馏水适量使成100 ml。乙液：取亚硝酸钠0.5 g，用蒸馏水溶解并稀释至100 ml，置冰箱内保存。临用时取甲液10 ml、乙液0.3 ml混匀）1 ml，摇匀，在15 ℃暗处放1 h，以相应的试剂为空白，扫描，在400～800 nm波长范围内测定吸收光谱。结果胆红素对照品溶液在533 nm波长处有最大吸收峰，故以533 nm为测定波长。

　　2.4 标准曲线 ml，置试管中，分别加乙醇至9 ml， 按“2.3”项下自“精密加入重氮化溶液”起依法操作，相应试剂做空白，在533 nm波长处测定吸光度 ，以吸光度为纵坐标， 浓度为横坐标绘制标准曲线，得回归方程： Y =6.441 X +0.006 7， r = 0.999 8。胆红素在0.010 3～0.050 0 mg/ml范围内，浓度与吸光度呈良好的线 精密度试验

　　取胆红素对照品溶液，分别于配制后0、3、6、9 h化煞为权是什么意思，按上述方法测定吸光度，结果表明对照品溶液在9 h之内稳定。

　　精密称取样品细粉约1瓶总量，精密加入胆红素对照品0.05 mg，置圆底烧瓶中，按“2.2”项下方法制备溶液6份，在533 nm波长处测定其吸光度，计算胆红素平均回收率为99.36%， RSD为0.45% （n=6），结果见表1。

　　取小儿化毒散3批，每批1瓶样品，按“2.2”项下方法平行制备3份供试品溶液，根据测得的吸光度和标准曲线 讨论

　　按方法同时制备空白样品溶液，在400～800 nm的波长范围内扫描，无吸收，不干扰胆红素的含量测定，故选择533 nm波长作为胆红素含量测定的检测波长是合理的。

　　小儿化毒散的原标准中无人工牛黄的含量测定，不能完整地控制该品种的质量。本实验采用药典方法比色法测定胆红素的含量，经多次测定，小儿化毒散中胆红素的含量限度为不低于41.4 ?g/瓶小儿化煞。通过上述方法学考察，建立了小儿化毒散中胆红素的含量测定方法，该方法简便快捷，结果准确，重现性、回收率好，能有效控制小儿化毒散中人工牛黄的质量。

　　[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典2010版（一部）[M]. 北京：中国医药科技出版社， 2010： 478.

　　[2] 孙新建， 李志浩， 吴进， 等. RP-HPLC测定小儿化毒散中大黄素和大黄酚的含量[J]. 中医药导报， 2010， 16（10）： 93-95.

　　[3] 罗晓茹， 曹红， 邢俊波， 等. 人工牛黄及其制剂中胆酸含量测定的研究进展[J]. 药学学报， 2009， 25（3）： 247-249.